銀屑病專題：擺脫“銀”影，迎光而立

(2024年10月29日是第21個“世界銀屑病日”。銀屑病是目前最常見的自身免疫性疾病之一，被喻為“上帝紋身”，在人群的發病率約為2-3%。其發病原因及發病機製均尚未完全明晰，目前認為是遺傳和環境因素共同作用導致。構建理想的銀屑病動物模型是銀屑病發病機製和開展藥物治療研究的關鍵。當前應用於研究的銀屑病動物模型種類較多（自發性、誘發性、異體移植和基因修飾型），各類模型都有各自的特點及局限性，但目前還不存在一種動物模型能夠全麵模擬銀屑病發生、發展的過程。

銀屑病及其機理研究

銀屑病（Psoriasis)，俗稱“牛皮癬”，是一種常見並易複發的慢性炎症性皮膚病，主要表現為軀幹、四肢的特征性紅色丘疹、斑塊及銀白色鱗屑，部分患者可合並關節症狀。銀屑病的特征是免疫細胞浸潤、表皮過度增殖和角質形成細胞分化異常。

銀屑病具有顯著的地域差異，赤道地區發病率最低，向兩極增加。對銀屑病發病機製的深入了解已經產生了越來越多的藥物靶點和分子藥物。其分子機理研究表明患者體內免疫細胞過度釋放促炎症因子（如IL-17等），先天及獲得性免疫係統長期處於激活狀態，從而引發多組織及器官的持續性損傷，其中角質形成細胞、樹突狀細胞和T細胞扮演了重要角色。

銀屑病發展的關鍵信號通路^[1]

過去十年中，在闡明銀屑病的分子發病機製方麵的研究已取得了重大進展。轉錄組學分析已廣泛用於鑒定與銀屑病病理相關的差異表達基因 (DEG)。全基因組關聯研究 (GWAS) 已經確定了多種遺傳變異和銀屑病易感基因。盡管現在對賦予疾病易感性的基因了解越來越深入，但對定義疾病分子特征的表達基因的調控網絡還知之甚少。已經鑒定了幾種在銀屑病轉錄組中被激活或抑製的轉錄因子 (TF)。除了重要的mRNA表達改變外，銀屑病的特征還在於特定的microRNA表達譜，與健康皮膚的表達譜不同。此外，通過Meta分析 (Meta-analysis) 得到一致的候選基因參考列表，用於進一步研究銀屑病病理學和新的治療靶點。

銀屑病是一種T細胞介導的慢性炎症性皮膚病，目前尚無法完全治愈，隻能通過藥膏、光療、免疫抑製劑等療法控製症狀，缺乏理想的動物模型是製約深入研究該病的重要原因。目前，已經開發了多種轉基因、敲除和重組的銀屑病模型。盡管存在局限性，但這些模型已經證明皮膚中的角質形成細胞增生、血管增生和細胞介導的免疫密切相關。其中，將受累和未受累的銀屑病皮膚移植到免疫缺陷小鼠身上的異種移植模型是唯一接近整合該疾病的完整遺傳、免疫和表型變化的模型。

不同模型比較^[1]

銀屑病類型

銀屑病可以分為尋常型銀屑病、膿皰型銀屑病、紅皮病型銀屑病、關節病型銀屑病。每一種銀屑病都有自身的形態特點，通過肉眼可以分辨出來。

❖ 尋常型銀屑病最為常見，又分為點滴型、斑塊型、屈側銀屑病等，典型的表現為紅斑、鱗屑性皮疹，刮去層層鱗屑，可見薄膜現象和點狀出血。膿皰型銀屑病，在紅斑或正常皮膚上出現針尖大膿皰。
❖ 紅皮病型銀屑病，紅斑麵積超過體表麵積90%以上，周身大麵積脫屑，伴有發熱等。
❖ 關節病型銀屑病，有類風濕關節炎的表現，可出現關節畸形等表現。

紅皮病型和膿皰型銀屑病，經常由尋常型銀屑病治療不當發展、加重而來。銀屑病患者受累皮膚的主要發現包括由於淺表血管擴張和表皮細胞周期改變導致的血管充血。這種變化被認為與炎症過程中釋放的各種炎性細胞因子有關，如腫瘤壞死因子-α (TNF-α)、幹擾素-γ (IFN-γ) 和白細胞介素-17 (IL-17)。

建立銀屑病動物模型

大多數動物疾病模型可分為：(i)自發、(ii)轉基因、(iii)誘導、(iv)陰性或 (v)孤兒，其中前三種最為豐富。

自發和轉基因模型是模仿人類狀況的遺傳變異體。誘導模型的特點是通過手術或基因改造或化學注射來創建。陰性模型主要用於研究抗病機製，而孤兒模型是人類中沒有相應疾病的動物。

銀屑病小鼠模型^[1]

自發性銀屑病動物模型

自發產生銀屑病樣病變的小鼠模型目前有缺皮脂 (asebia, ab/ab) 突變鼠、魚鱗狀皮膚 (ichthyosis, ic/ic) 突變鼠，無毛 (hairless, hr/hr) 突變鼠和“鱗片狀皮膚” (flaky skin, fsn/fsn) 突變鼠等。

純合子asebia (Scd1^ab/Scd1^ab) 鼠是第一個角化過度的模型。皮脂腺的喪失是由 Scd1基因（編碼硬脂酰輔酶 A 去飽和酶）突變引起的。因此，成年Scd1^ab/Scd1^ab 鼠的皮膚變得鱗片狀，表皮棘層肥厚，血管化增加，巨噬細胞和肥大細胞大量湧入。在增厚的表皮中，長毛囊以銳角延伸到深層皮下組織。真皮變得過度生長，成纖維細胞密度更高。

自發性慢性增生性皮炎突變 (Sharpin^cpdm/Sharpin^cpdm) 模型顯示出多種銀屑病特征。小鼠皮膚變得紅色和片狀，血管擴張。此外，皮膚被嗜酸性粒細胞、巨噬細胞和肥大細胞占據。這種表型可以使用皮質類固醇逆轉，但不能通過環孢菌素A逆轉。

誘發性銀屑病動物模型

受限於模型建立難度和成本，直接誘發類模型使用最為廣泛。研究表明主要是通過實現以下幾方麵而誘導動物產生銀屑病：

1）激活天然免疫係統，如塗抹Imiquimod (咪喹莫特，IMQ)激活TLR7/8信號通路；咪喹莫特 (5%) 誘導小鼠模型：咪喹莫特為Toll樣受體7/8激動劑，能激活固有免疫係統導致中性粒細胞、γδ T細胞產生炎症因子等，誘導小鼠出現銀屑病樣皮損;

2）激活功能失調T細胞反應，如免疫缺陷小鼠移植CD4+，CD8+，Th17細胞等；T細胞移植模型的成功表明了體內調節性T細胞亞群的功能失調在銀屑病發病機製中的重要作用。

3）打破細胞因子平衡，直接將細胞因子注入小鼠皮膚或耳廓，造成皮膚或耳廓出現銀屑病樣皮損，建立銀屑病模型。常用的皮下注射細胞因子包括IL-6、IL-21、IL-12、IL-23等，可在短時間內造就銀屑病樣皮損；

4）破壞血管或皮膚神經功能，如過表達或抑製血管生成因子等。

異體移植銀屑病動物模型

異體移植模型包括異種移植模型和同種不同品係小鼠間移植模型。後者主要是指給免疫缺陷小鼠靜脈注射不同品係小鼠主要組織相容性複合體 (MHC) 不相容的免疫細胞進行免疫重建。異種移植銀屑病動物模型是將銀屑病患者的皮損直接植入免疫缺陷的小鼠，使移植物維持或產生銀屑病樣表型。最常用到的小鼠受體有裸鼠、SCID小鼠和AGR129小鼠。

異種移植模型的主要優點在於采用了人體來源的組織，最接近人類疾病的免疫和遺傳基礎，在臨床前研究中，對於觀察新藥物的療效、代謝、不良反應等均有很大優勢。此類模型不僅能表現出銀屑病樣外觀改變，而且能在較長時間內較好地保持複雜的病理生理變化。其局限性在於隻是複製銀屑病的皮膚局部反應，不能反映銀屑病的整體發病情況。

然而，構建這種模型需要較大量的供體組織，供體取材後需要立即進行移植以防止移植物缺血，對操作技術要求較高。另外，由於移植物的質量參差不齊和宿主小鼠體內缺乏與銀屑病患者相似的內環境（如缺乏銀屑病相關細胞因子的高表達），也可能導致研究結果出現偏差，這些局限性均限製了異種移植模型在銀屑病研究中的廣泛應用。

基因修飾銀屑病動物模型

銀屑病發病過程中有大量細胞因子、黏附因子、轉錄因子以及其他炎性介質參與。如IL-6、TGF-α可以促進角質形成細胞增殖，IL-1、TNF-α、VEGF誘導血管生成並趨化體內炎症細胞。轉基因或基因敲除技術為研究這些因子的功能提供了高效的平台。

根據基因工程技術的特點，銀屑病小鼠模型主要分為條件性基因敲除和先天性基因表達異常小鼠模型。前者是在小鼠成年以後，通過注射枸櫞酸他莫昔芬特異性敲除角質形成細胞內的某些蛋白質而誘發銀屑病，更接近於人類銀屑病的發生過程。後者是通過特異性細胞內基因敲除或插入技術，使小鼠出生時即有角質形成細胞內蛋白質表達增多或缺失，更接近於先天性疾病的發病模式。

基因工程動物模型為在體研究關鍵因子的功能提供了平台，揭示了部分因子在銀屑病發生發展中的重要作用。這些模型也能夠成為研究細胞因子或因子受體拮抗劑的工具，以利於臨床藥物篩選。然而，事實表明，單一因子的變化並不足以誘發完整的銀屑病病理過程。具有銀屑病表型的動物模型，亦不能真實模擬銀屑病發病過程中細胞因子網絡的相互作用。

建立銀屑病動物模型的方法^[2]

銀屑病常見造模及治療方法

構建理想的銀屑病動物模型是銀屑病發病機製和開展藥物治療研究的關鍵，銀屑病是一種常見的慢性、複發性、炎症性皮膚病，屬於多基因遺傳性疾病，且受環境因素影響。具有特征性紅色丘疹、斑塊及銀白色鱗屑，頑固難治，頻繁複發，罹患終身等特點。咪喹莫特誘導銀屑病是應用較多也較為成熟的一種方法。咪喹莫特 (IMQ) 是Toll樣受體 (TLR) 7/8的激動劑，臨床研究結果表明該藥可誘發人類銀屑病。IMQ誘導的銀屑病小鼠模型再現了人類銀屑病的典型臨床症狀及病理特征，是研究銀屑病可行的動物模型。

造模流程示意圖

rhIL-23R-CHR/Fc 改善了咪喹莫特 (IMQ) 誘導的銀屑病樣模型中的皮膚炎症^[3]

hjc黄金城銀屑病藥效研究及案例分享

由於銀屑病本身病因以及發病機製的不確切，尚且沒有和人類銀屑病完全吻合的動物模型，因此在眾多類型的銀屑病模型中，結合自己的研究目的，恰當的選取模型類型十分重要。

hjc黄金城非腫瘤藥效平台模擬銀屑病的建模模型種類有：小鼠陰道上皮有絲分裂模型、小鼠尾部鱗片模型、咪喹莫特誘導的背部皮膚銀屑病模型（小鼠/大鼠）和IL-23誘導小鼠耳廓銀屑病皮損樣模型等。

01 咪喹莫特誘導的背部皮膚銀屑病模型案例

銀屑病作為一種慢性炎症性皮膚病，與自身免疫功能紊亂等多種誘因有關。銀屑病會導致皮膚成分的改變，目前普遍認為銀屑病是一種免疫細胞及免疫相關細胞共同介導的炎症性皮膚病。

咪喹莫特 (Imiquimod, IMQ) 誘導的小鼠模型是受到廣泛認可的銀屑病類動物模型之一。IMQ是Toll樣受體 (TLR) 7/8的配體。由於TLRs分布於巨噬細胞、單核細胞和漿細胞樣樹突細胞 (pDC) 上，因此IMQ能夠強烈激活免疫係統。局部使用IMQ可誘導銀屑病，能夠較好地模擬人類銀屑病樣的皮損表現，並一定程度地存在與銀屑病相似的固有免疫和獲得性免疫紊亂，可用於研究銀屑病潛在機製和評估新療法。

02 IL-23誘導的小鼠耳廓銀屑病皮損樣模型案例

IL-23 (白細胞介素-23) 是一種異源二聚體細胞因子，由p19亞基 (IL-23獨有) 和p40亞基 (與IL-12共享) 通過二硫鍵連接形成。IL-23/Th17通路是銀屑病的主要致病通路。IL-23能夠促進Th17細胞的分化，產生IL-17A、IL-17F及IL-22等細胞因子，從而導致角質形成細胞異常分化和炎症。其中，IL-23/IL-17A通路在銀屑病中起著至關重要的作用。

IL-23注射模型的優勢在於使用單一細胞因子，並且這種細胞因子在銀屑病中引發炎症的作用已得到證實。經皮內注射IL-23可以誘導小鼠產生銀屑病樣皮膚病變，建立便捷且成本較低，被廣泛用於人類銀屑病研究。

我們的客戶正竭力將更多的新型療法帶給銀屑病患者及其家庭，hjc黄金城將持續與他們並肩作戰，建設更高效，更先進的研究方法。

參考文獻：

[1]Katarzyna Bocheńska,  et al. Models in the Research Process of Psoriasis. Int J Mol Sci. 2017 Nov 24;18(12):2514.  doi: 10.3390/ijms18122514.
[2] Michael P Schön, et al. Animal models of psoriasis-highlights and drawbacks. J Allergy Clin Immunol. 2021 Feb;147(2):439-455.  doi: 10.1016/j.jaci.2020.04.034. 
[3] Yue Gao, et al. Human IL-23R Cytokine-Binding Homology Region-Fc Fusion Protein Ameliorates Psoriasis via the Decrease of Systemic Th17 and ILC3 Cell Responses. Int J Mol Sci. 2019 Aug 26;20(17):4170.  doi: 10.3390/ijms20174170.
[4]Johann E Gudjonsson, et al. Mouse models of psoriasis. J Invest Dermatol (IF: 8.55; Q1). 2007 Jun;127(6):1292-308.  doi: 10.1038/sj.jid.5700807. Epub 2007 Apr 12.

文末分享

國際銀屑病協會聯合會（IFPA）的官方網站發布，2024年世界銀屑病日的主題是“FAMILY家庭”，並呼籲公眾認識到銀屑病不僅會影響患者個人，還會影響他們的家庭，銀屑病患者及其家人都應該得到支持。

對此，IFPA通過今年推出的宣傳資料，鼓勵研究和理解銀屑病對銀屑病患者家庭成員的影響，以便出台政策改善銀屑病家庭的生活質量。在今年的節日工具包中就包含了多個量表工具，用來評估患者和家庭成員的量化指標。

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